作者:王玉風??楊?俠??董曉光?
??? 發表時間:眼科新進展??2012年6月?第32卷??第6期?????
??? 【摘要】??
??? 目的?觀察高糖培養的人臍靜脈內皮細胞(human?umbilical?vein?endothelial?cells,HUVEC)中玻連蛋白(vitronectin,VN)表達的變化、細胞微絲骨架的改變以及細胞遷移能力、成管能力的變化。?
??? 方法?建立高糖培養的HUVEC體外模型,并常規培養HUVEC作為正常對照,Western?blot方法檢測VN蛋白的表達,免疫熒光細胞化學法觀察HUVEC中微絲骨架F-actin的變化,劃痕法檢測HUVEC遷移能力的改變,Matrigel法檢測HUVEC的成管能力。?
??? 結果?培養24h時,正常組和高糖組中VN蛋白表達量分別為0.893±0.119、1.295±0.080,48h時分別為0.874±0.115、1.724±0.098,差異均有統計學意義(t=-4.857、-9.710,均為P<0.05)。免疫熒光細胞化學結果顯示培養24h、48h時高糖組中都伴有更加明顯的細胞微絲骨架結構改變。劃痕法檢測培養24h時正常組和高糖組中遷移到劃痕內的細胞數分別為(198.000±15.880)個、(242.000±11.130)?個,48h時分別為(293.000±8.681)個、(334.000±10.863)個,差異均有統計學意義(t=-5.495、-7.193,均為P<0.05)。Matrigel法發現培養6h時高糖組中形成的閉合管腔數目(120.000±9.813)個多于正常組(91.000±9.867)個,12h時形成的閉合管腔數目(19.000?±3.209)個也多于正常組(8.000±3.011)個,差異均有統計學意義(t=-5.163、-5.659,均為P<0.05)。?
??? 結論?VN可能在糖尿病視網膜病變中起一定作用,且VN功能的發揮可能涉及到細胞骨架重塑,但需要進一步干擾VN的表達以證實其作用。?