作者：王曄??趙曉雯??謝立信??于洋?
??? 發表時間：中華實驗眼科雜志??2012年11月??第30卷??第11期?????
??? 【摘要】??
??? 背景??糖尿病是引發角膜神經病變的高危因素之一。沉默信號調控因子1(Sirt1)在糖代謝、脂代謝、胰島素分泌調節中發揮著重要的作用，并與神經系統性疾病密切相關。目前，關于Sirt1與糖尿病性角膜神經病變的關系尚不完全清楚。?
??? 目的??探討Sirt1在1型糖尿病C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠角膜及三叉神經節中的表達及其意義，探討Sirt1與糖尿病性角膜神經病變的關系。?
??? 方法??取C57BL/6-lns2Akita/J雄性小鼠與同窩出生的野生型C57BL/6小鼠各8只，分別作為1型糖尿病模型組和正常對照組。兩組小鼠均在12月齡時過量麻醉處死，處死前檢測空腹血糖、測體質量。取小鼠三叉神經節和角膜組織，采用蘇木精-伊紅染色法檢測兩組小鼠三叉神經節和角膜組織的組織病理學變化，用免疫組織化學法檢測三叉神經節和角膜組織中Sirt1蛋白的表達和定位；用熒光定量PCR法檢測Sirt1?mRNA在三又神經節和角膜組織中的表達；采用Westernblot檢測兩組小鼠三叉神經節和角膜組織中Sirt1蛋白的相對表達量，并進行比較。?
??? 結果??C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠三叉神經節細胞大小不均，細胞排列較為疏松，神經纖維排列紊亂，角膜上皮細胞層數減少，角膜變薄；野生型C57BL/6小鼠神經節細胞排列緊密，細胞形態均一，神經纖維排列整齊。免疫組織化學法檢測結果顯示，C57BL/6-1ns2Akita/J小鼠角膜中Sirt1蛋白的表達強度低于野生型C57BL/6小鼠。熒光定量PCR結果顯示，Sirt1?mRNA在C57BL/6-lns2Akita/J小鼠角膜表達的灰度值顯著低于野生型C57BL/6小鼠(0.56±0.03?VS.0.98±0.13)，差異有統計學意義(t=5.853，P=0.010)；C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠三叉神經節中Sirt1?mRNA表達的灰度值為2.45±0.8，低于野生型C57BL/6小鼠的2.51士0.22，但差異無統計學意義(t=0.587，P=0.599)。Western?blot檢測結果顯示，C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠角膜中Sirt1蛋白的表達顯著低于野生型C57BL/6小鼠(0.780土0.017?vs.1.300±O.012)，差異有統計學意義(t=33.140，P=0.001)；兩組小鼠間三叉神經節中Sirt1蛋白的表達差異無統計學意義(1.100±0.015?vs.1.110±0.017)(t=0.430，P=0.709)。?
??? 結論??12月齡C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠角膜的神經和結構發育異常，Sirt1參與糖尿病角膜病變的發病，有可能是潛在的靶點分子。?